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QTD-实时定量检测试剂盒 高灵敏 高特异 高准确

一、背景知识

端粒酶合成染色体末端的端粒的酶 。端粒是真核细胞染色体末端的DNA序列,它的作用是维护基因信息在复制过程中的准确性。在正常情况下,每个细胞分裂周期都会使端粒变得越来越短。当端粒短到一定程度时,就会发出信号,细胞停止分裂。

端粒属于以RNA为模板来催化DNA合成的反转录酶。端粒酶包括RNA和蛋白质成份。酶的RNA部分与端粒酶上的DNA相结合,而蛋白质部分则吸引DNA亚单位并将其联到染色体的末端。

多数人的肿瘤组织都有端粒酶,但正常组织除了那些胚胎(如睾丸/卵巢)外,一般不表达端粒酶。更新组织的干细胞表达很低水平的端粒酶。在肿瘤附近的组织中,偶尔可查出端粒酶活性,那可能表明有隐性微型的癌变。

大量的资料表明,端粒酶和癌细胞的无限制生长有关。和正常细胞不同,在癌细胞中,端粒酶通过维持端粒的长度而不会使细胞细胞产生停止分裂的信号。所以,有无端粒酶是正常细胞和肿瘤细胞的一个重要区别,对端粒酶进行检测可以发现早期的肿瘤。

而且大量的资料表明,端粒酶活性高低与肿瘤严重程度成正相关,良性肿瘤与恶性肿瘤的端粒酶表达也存在显著差异性,故可以通过对端粒酶的检测来反映肿瘤的严重程度。从而可以判断病情,对治疗起指导作用;对患者用药及放化疗前后检测端粒酶,也可以实现对疗效的评价。

二、产品介绍

端粒酶定量检测试剂盒(QTD)是美国联合生物技术公司(ABI),为肿瘤的早期临床诊断和实验室"实时定量"检测端粒酶活性最新研发的高科技前沿产品。本产品运用实时定量PCR技术,实现了定量检测端粒酶的活性,可以满足最前沿的要求。

产品采用目前最先进实时PCR反应一步法,实现了定量检测。产品提供了反应混合物,只需加入模板即可。PCR扩增一步完成,整个实验可在几小时完成,大大提高了效率。其特别的识别系统,敏感度高,可检测出很低水平(譬如1-5个293T细胞)的端粒酶活性。实时定量PCR的分析系统可以有效减少实验的系统误差,增加实验的稳定性;产品中特制的TSR模板为反应提供了阳性对照和定量标准。具有国内其他产品不可比拟的优点。

产品实验原理为端粒重复序列扩增法(TRAP)。将活细胞或新鲜的冻存细胞或组织(端粒酶具有活性)裂解后,检测提取物中端粒酶的活性。在特定的缓冲液条件中,端粒酶可以利用dNTPs在寡核苷酸末端催化合成端粒重复序列,将端粒酶扩增产物经实时定量PCR扩增后,利用核酸荧光染料SYBR Green检测扩增产物的荧光信号,从而算出端粒酶的活性。

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